演者：村山　宗司

ベックマン・コールター株式会社 ライフサイエンス 遠心機 シニアアプリケーション スペシャリスト

概要

超遠心分析法（AUC）は、低分子薬物から高分子のウイルスに至るまで測定範囲は幅広く、インスリンや抗体、遺伝子治療用のアデノ随伴性ウイルスベクター（AAVベクター）などバイオ医薬品の特性評価において使用されている、現在最も強力な生物物理学的な分析ツールの1つです。

AAVベクターは蛋白質のキャプシド（殻）に遺伝子が内包された複雑な構造をとっています。このためサンプル中には完全な遺伝子が内包されたAAVベクターと遺伝子が空もしくは一部欠損したAAVベクター、さらにはこれらの凝集物が存在することがあります。

これらのAAVベクターは質量や密度が異なるため、蛋白質の凝集解析で使用される汎用的な機器による定量的な解析は難しいのですが、AUCではこれらのAAVベクターが遠心力によって沈降していく様子を観察でき流体力学的に分析することができるため、AAVベクターの密度、形状が反映された固有の沈降係数（sedimentation coefficient：S）という値で求めることができます。さらに、AUCはそれぞれのAAVベクターに対応した沈降係数（S）とその成分比率を求めることができるため、AAVベクターの均一性ならびに定量的な値づけが簡単にできます。 また、AUCはクロマトグラフィー法、電気泳動法、質量分析法、電子顕微鏡観察などの手法で必要な溶媒置換、サンプルを基盤に固定などの前処理や、分子篩などの担体を一切使用せず、サンプルを溶解した組成の溶液のままで測定することができます。

本セミナーでは、超遠心分析法の基本原理、OptimaAUCに搭載された最新の紫外可視吸光測定計とレイリー干渉計の2つの光学系テクノロジーの概要、機器のセットアップのやり方、沈降速度法とデータ解析手法についてご説明します。そして、AAVベクターの特性評価における他の分析方法との比較、ならびにAUCによるAAVベクター解析のアプリケーションについてご紹介します。

（※ この動画は、2020年8月に行われたWebセミナーを配信用に編集したものです。）